ZapingNews: O novo teste VaNGuard deteta o SARS-CoV-2 mesmo depois de mutação

Usando a edição do gene CRISPR, os cientistas da Universidade Tecnológica de Nanyang desenvolveram um teste de diagnóstico chamado VaNGuard (Variant Nucleotide Guard) para detetar o vírus SARS-CoV-2, mesmo depois de ter passado por mutações.

Existem milhares de variantes do SARS-CoV-2 , incluindo algumas que se espalharam amplamente no Reino Unido, África do Sul e Brasil.

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Uma vacina contra Covid -19 em forma de pílula pode entrar em testes clínicos este ano.

O teste pode ser usado em amostras brutas de pacientes num ambiente clínico. Não haverá necessidade de purificação de RNA. Uma característica interessante é que os resultados demoram apenas testes 30 minutos.

Como os cientistas relataram, o teste VaNGuard pode ser implantado em ambientes onde a confirmação rápida do status COVID-19 dos indivíduos é fundamental.

O professor associado da NTU, Tan Meng How, disse. “Os vírus são muito inteligentes. Eles podem sofrer mutação, editar ou embaralhar seu material genético, o que significa que os testes de diagnóstico podem falhar em detetá-los. Portanto, gastamos um esforço considerável no desenvolvimento de um teste robusto e sensível que pode detetar os vírus mesmo quando eles alteram suas sequências genéticas. Além disso, testes frequentes são essenciais para ajudar a interromper a transmissão de vírus dentro das populações, por isso desenvolvemos nossos testes para serem rápidos e acessíveis, tornando-os implantáveis em locais com poucos recursos. ”

Como o teste deteta um vírus?

O teste depende principalmente de uma mistura de reação contendo enAsCas12a, uma variante da enzima Cas12a que atua como uma "tesoura molecular". A enzima enAsCas12a tem como alvo segmentos específicos do material genético SARS-CoV-2 e os retira do resto de seu genoma viral.

A enzima deteta o vírus quando procura com sucesso os segmentos do vírus. Duas moléculas diferentes conhecidas como RNAs guias, que programaram a enzima, desempenham um papel vital no reconhecimento de locais específicos no genoma da SARS-CoV-2.

Cada RNA guia está previsto reconhecer mais de 99,5 por cento dos milhares de isolados de SARS-CoV-2 que foram sequenciados até agora em todo o mundo.

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O professor Assoc Tan explicou: “A combinação de dois ou mais RNAs guia com a enzima enAsCas12a garante que, se um dos RNAs guia falhar em guiá-lo para o segmento correto do vírus devido a uma mutação, o outro RNA guia ainda pode 'resgatar' essa incompatibilidade. ”

O teste VaNGuard pode reconhecer até duas mutações nos locais alvo no genoma SARS-CoV-2.

Quando o vírus é detetado, a enzima torna-se hiperativada e começa a cortar outro material genético detetável. Quando consegue reduzir o material, a enzima começa a brilhar por causa de um leitor de microplaca. Este instrumento de laboratório pode detetar e quantificar os fótons de luz emitidos pela molécula.

O Professor Assoc Tan, que também é do Instituto Genoma de Singapura na Agência para a Ciência, Tecnologia e Pesquisa, Singapura (A * STAR), explicou : “Se o vírus estiver presente, a molécula brilhará. Caso contrário, significa que o vírus não está presente para causar a hiperativação da tesoura molecular. ”

Para tornar este teste mais fácil de usar, os cientistas integraram-no numa tira de papel especialmente tratada que se parece com um teste de gravidez. A tira de papel é mergulhada em um tubo contendo a amostra bruta da nasofaringe e a mistura de reação. Na presença de um vírus SARS-CoV-2 ou de sua variante, duas bandas fortes aparecerão na tira de papel. Na ausência do vírus, apenas uma banda aparecerá.

Ao sintetizar amostras de RNA, os cientistas foram capazes de validar a capacidade do teste VaNGuard.